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用分子检验识别急性移植排异反应

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该用户从未签到

发表于 2015-3-15 14:30:06 | 显示全部楼层 |阅读模式

肾移植的急性排异(AR)增大了移植肾慢性损伤和衰竭的风险,所以急需无创分子测定来改进疾病诊断和病人监护。


BioMark HD和EP1平台拥有数字阵列集成流控电路,可实现定量实时聚合酶链反应


尽管用了免疫抑制疗法,大约15%到20%的肾移植患者仍会发生急性排异,血清肌酐是肾功能的标记物,它水平的升高往往预示着排异,然后进行肾活组织检查,确认是否发生了排异。


美国加利福尼亚大学旧金山分校的科学家与来自多国的科学家合作,在2005年至2012年间收集了美国、墨西哥和西班牙的八座肾移植中心438名成人和儿童肾移植患者的558份外周血样本,以开发定量实时聚合酶链反应(qPCR)检验产品。他们用急性排异或无急性排异(由肾活组织检查确定)成人的143份样本开发了这种检验产品,然后用三组患者完成并确证该检验产品。


用基于柱方法的试剂盒提取总核糖核酸(RNA),在安捷伦科技公司(Santa Clara, CA, USA)的2100生物分析仪上用RNA 6000纳米芯片实验室试剂盒测量RNA完整度。在96.96动态阵列和芯片上执行微流控qPCR,通过HX IFC控制器预先加载该芯片并在Fluidigm公司(South San Francisco, CA, USA)的BioMark qPCR平台上执行qPCR。


科研小组评估了43个基因中10个基因的差异表达,选择已确证的同样10个基因作为标记物,用标准化的临床实验样本收集和处理程序诊断外周血中急性排异的。为了提高143份成人样本的急性排异诊断准确度,用多种统计建模方法又找到7个基因,提高了基因组合鉴别急性排异与非急性排异样本的准确度,所以最终的选择是17个基因。该测定名为kSORT,能区分急性排异风险高和风险低的患者。无论任何年龄、移植后经过的时间以及样本源,kSORT测定都能够检测血液中的急性排异,无需额外的数据归一化。


该研究的论文发表于2014年11月11日的《公共科学图书馆》杂志《医学》分册上。作者总结说,kSORT测定是一种简单、稳定、可用于临床的血液检验。他们正在用 kSORT进行一项前瞻性观察实验以及另一项前瞻性随机双盲临床干预实验,以确定移植后如何继续应用kSORT,辅助现有的临床规程指南分类病人的免疫风险、药物载荷和活检要求。

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    发表于 2015-5-17 19:28:20 | 显示全部楼层
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